蜜蜂麻痹病的诊断与血清反应
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用血清反应来诊断蜜蜂麻痹病,一般分为三步。
1.制备抗原
取典型的麻痹病蜂50只,置研钵内,研碎,加磷酸缓冲液或生理盐水50毫升(pH=7.2-7.4),制成悬浮液,在6000r/分钟离心15分钟,取上清液,再经石棉漏斗过滤后制成。经无菌检查合格后,放低温冰箱保存备用。
2.制备抗体
先用已制备好的抗原按下列剂量和程度注入兔耳静脉内:注射完毕后,经过两星期采血,分离血清,保存在-20℃下备用。
3.诊断
将供检病蜂的肠道拉出,浸入卡尔努氏液(用无水乙醇6份,三氮甲烷3份和冰乙酸l份配成)30分钟,再以常规方法将小肠取下用石蜡包埋,制成切片。切片经脱蜡后,用稀释l/10的已制备的抗体血清涂上。放在37℃下20分钟,再用蒸馏水仔细冲洗后,用异硫氰酸盐萤光色素进行标记。
经标记后的切片标本,即可放在荧光显微镜下,以水浸没进行镜检。仔细观察蓝-紫色光,并作显微摄影。
研究结果发现,用麻痹病病蜂制备的组织切片,在小肠细胞内形成具有特殊发光的、近圆形的、多形态的内含物,并局限在细胞质的围核部分,直径为0.5~2.0μm。
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本文来源:39蜂疗网 ( 编辑:杨乐)
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