蜜蜂生化(同工酶)标记

2024年07月01日已有人阅读病友分享我想学蜂疗

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1941年美国遗传学家G．W．Beadle和生化学家K．L．Tatum通过研究红色面包霉的生化突变型，对一系列营养缺陷型的遗传分析提出了“一个基因一个酶”的假设，创立了生化遗传学。20世纪50年代许多科学家发现同一种酶可具有多种不同的形式，同时由于淀粉凝胶技术的发展和组织化学染色剂的使用，使这样的多种形式成为肉眼可辨的带型——酶谱。

和大多数其他基因一样，编码酶的基因也可以通过适当的方式定位于染色体上，在具有大量已经定位形态标记的物种中，可以通过二点或三点测验对同工酶基因进行定位。在没有已定位的标记可以利用时，可根据同工酶基因定位等位基因的共显性特性，通过产生多个酶定位处于杂合状态的F1，可以同时确定这些同工酶定位的连锁关系。

由于蜜蜂中没有已定位的标记可利用，蜜蜂的同工酶基因至今尚未定位于染色体上，研究较多的是各种蜜蜂的同工酶基因型、基因型频率、基因频率、杂合度等，为蜜蜂分类提供更为准确的依据。蜜蜂同工酶的研究表明，同工酶等位基因变异性低，到目前为止已知蜜蜂中的多态性位点有6种。同工酶及蛋白质多态性是生化变异的主要组成部分，它们可作为分类的依据和遗传标记，在蜜蜂遗传育种研究个已得到应用。

(一)苹果酸脱氢酶目前国际上较为通用办法是，当表示酶时用大写缩写如MDH，表示基因位点时，用小写斜体如Mdh。从20世纪70年代开始，许多学者经过多次实验，确定了蜜蜂Mdh由a，b，c三个等位基因控制，这三个等位基因在不同的地理种群中分布不同，有的种群有三个等位基因，有的种群有两个等位基因，有的种群只存在一个等位基因，没有多态现象。

Nunamaker和Wilson(1981)从南非的两个地方，取了19群非洲蜜蜂做为试验材料，发现都是aa型纯合子：Badino等(1982，1983)报道，在意大利的山麓地区意大利蜂表现出一个纯台的cc等位基因的频率分布，来自法国的一个蜂场的欧洲黑蜂表现为等位基因b的单态性。众多的研究结果表明，意大利蜜蜂中等位基因c占有优势；欧洲黑蜂中b的合里最高；而非洲蜜蜂和非洲化蜜蜂中a的含量最高。

Robinson(1988)利用苹果酸脱氢酶同工酶作为遗传标记，发现采集蜂、守卫蜂、清理死尸的工蜂的苹果酸脱氢配同工酶基因型不同，从而得出基因型决定成年工蜂劳动分工的结论。该理论在西方蜜蜂中已得到不断的证实并渐趋公认。

关迎辉等(1994)对意蜂的三个血统——浙农大1号意蜂、湖北本意和原意的MDH II进行测定，发现它们的基因型频率、基因频率之间存在显著差异，为浙农大1号意蜂品种的确立提供一个生化和遗传依据。李举怀等(1996)报道了西方蜜蜂的三个亚种：意大利蜂、卡尼鄂拉蜂和喀尔巴阡蜂成年工蜂MDH II同工酶的基出型频率、基因频率、杂合度和纯合度，独立性检验表明，3个亚种间存在显著差异。

(二)乙醇脱氮酶 Martin(1977)在雄蜂和工蜂蛹中发现有3个ADH等位基因的多态性酶系。该等位基因频率在非洲化蜜蜂和欧洲蜜蜂中是不同的。在小幼虫中并没有发现有ADH的活性，在预蛹期和白眼蛹时活性达到最大，在羽化的蜜蜂中活性下降直至全部消失。

(三)酯酶西方蜜蜂的酯酶至少有一种是多态性的，具有下种表型。从酶谱分析，编码此酯酶的基因有两个不同的等位基因。

据李绍文等(1985)报道，中蜂没有此酯酶，而在意蜂中此酯酶在蛹期有明显的变化，白眼蛹(1—3天)没有这种酯酶，红眼蛹(6—7天)这种酶表现较浅的颜色，褐眼蛹(10一12天)时这种酶呈现深色带。

(四)苹果酸酶 sheppard和Berlocher(1984)发现挪威的6群欧洲黑蜂的苹果酸酶具多态性。1985年，他们又在意大利的5群意蜂中检测出此酶的多态性。但李绍文(1985)对北京的意蜂进行酶谱分析时，未发现有多态现象。

(五)肽酶(PEP) Del Lhama和Mestriner(1984)报道了PEP的多态性和—个空白的等位基因。

(六)蛋白质—3(P—3) Mestriner(1969)测定了由2个不完全显性的等位基因决定的多肽性的P—3的遗传，它们只出现在蛹期。